抗體：單克隆抗體和多克隆抗體

抗體，也稱為免疫球蛋白，由B細(xì)胞（漿細(xì)胞）分泌，用于中和細(xì)菌和病毒等抗原?？贵w的結(jié)構(gòu)在上篇文章也做了一些介紹《抗體：抗體結(jié)構(gòu)》，今天來介紹下多克隆抗體和單克隆抗體，本概述將描述單克隆和多克隆抗體的合成、它們的分化特性及其在生命科學(xué)中的作用。

單克隆抗體

單克隆抗體(mAb)由來自單個親本細(xì)胞的克隆體相同的B細(xì)胞產(chǎn)生。這意味著單克隆抗體具有單價親和力，并且僅識別抗原的相同表位。

與在活體動物體內(nèi)產(chǎn)生的多克隆抗體不同，單克隆抗體是使用組織培養(yǎng)技術(shù)在體外產(chǎn)生的。該過程首先將所需抗原多次注射到動物（通常是小鼠）體內(nèi)。一旦動物產(chǎn)生免疫反應(yīng)，就從動物脾臟中分離出B淋巴細(xì)胞，并將其與骨髓瘤細(xì)胞系融合，形成永生化B細(xì)胞-骨髓瘤雜交瘤。雜交瘤能夠在培養(yǎng)中持續(xù)生長并產(chǎn)生抗體，然后篩選出所需的mAb。

多克隆抗體

多克隆抗體（pAbs）是異質(zhì)性抗體的混合物，通常由體內(nèi)不同的B細(xì)胞克隆產(chǎn)生，能夠識別并結(jié)合單一抗原的多個不同表位。

多克隆抗體是通過將免疫原注射到動物體內(nèi)而產(chǎn)生的。在向動物注射特定抗原以引發(fā)初次免疫反應(yīng)后，對動物進行二次甚至三次免疫，以產(chǎn)生針對特定抗原的更高滴度的抗體。免疫后，可直接從血清（已去除凝血蛋白和紅細(xì)胞的血液）中獲得多克隆抗體，或純化以獲得不含其他血清蛋白的溶液。

單克隆和多克隆特性

多克隆和單克隆的優(yōu)缺點對比

類型	優(yōu)點	缺點
單克隆抗體	1.僅對抗原一個表位進行高度特異性識別 2.實驗間一致性高 3.永生雜交瘤細(xì)胞系能夠產(chǎn)生無限量的抗體 4.最小的背景噪音和交叉反應(yīng) 5.非常適合親和純化	1.開發(fā)單克隆抗體需要時間，并且需要很高的技術(shù)技能。 2.它們可以產(chǎn)生大量特異性抗體，但可能過于特異性而無法在多種物種中檢測到。 3.易受表位變化的影響。即使輕微的構(gòu)象變化也可能導(dǎo)致結(jié)合能力急劇下降。
多克隆抗體	1.生產(chǎn)時間短，成本低。 2.高度穩(wěn)定，可耐受 pH 值或緩沖液的變化。 3.高親和力。由于抗體與多個表位結(jié)合，因此即使表達(dá)水平較低，它們也可以幫助放大來自目標(biāo)蛋白的信號。這使得這些抗體成為免疫沉淀和染色質(zhì)免疫沉淀的理想選擇。 4.耐受抗原的微小變化。多克隆抗體對抗原變化（輕微變性、多態(tài)性、糖基化異質(zhì)性）的敏感性低于單克隆抗體。	1.容易出現(xiàn)批次間差異。 2.由于存在多個表位，因此檢查免疫原序列是否存在交叉反應(yīng)非常重要。

多克隆抗體與單克隆抗體應(yīng)用

單克隆抗體和多克隆抗體哪個好？這取決于單克隆抗體和多克隆抗體的不同特性。

多克隆抗體是診斷測定和血凝反應(yīng)中的理想試劑，因為它們能夠識別目標(biāo)分子的不同表位。多克隆抗體的最佳用途是檢測未知抗原。多克隆抗體用作免疫測定中的二抗（例如ELISA、蛋白質(zhì)印跡、微陣列測定、免疫組織化學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)）。它們的作用是結(jié)合不同的表位并放大信號，從而實現(xiàn)更好的檢測。

相比之下，單克隆抗體提供了無限的同質(zhì)抗體來源，并且一旦表征，其行為即可預(yù)測。單克隆抗體通常用作免疫測定中的一抗，因為它們能夠特異性地結(jié)合抗原的單個表位。通過臨床應(yīng)用，使用每種抗體的一些缺點已被消除。公司可以純化多克隆抗體以限制其測定中的交叉反應(yīng)程度。單克隆抗體的組合導(dǎo)致捕獲多個表位并擴大其特異性。

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