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抗體:一抗和二抗區(qū)別

  抗體也叫“免疫球蛋白,”是免疫系統(tǒng)對“外來”物質(zhì)(病毒、細(xì)菌、真菌和寄生蟲)產(chǎn)生的糖蛋白。每種抗體有針對特定類型的抗原,它會與其同源抗原結(jié)合并中和微生物在感染期間產(chǎn)生的毒素。抗體存在于血漿、血清、唾液和淚液等液體中,除此之外,它們約占血漿蛋白質(zhì)的20%。抗體經(jīng)常用來做實驗研究,接下來上海紀(jì)寧生物說下抗體結(jié)構(gòu)及一二抗區(qū)別介紹。

  抗體的結(jié)構(gòu)

  一抗和二抗具有共同的結(jié)構(gòu)。抗體是Y形分子,由三個大小大致相等的部分組成。它們由兩條相同的輕鏈和兩條相同的重鏈組成-二硫鍵將兩條重鏈連接在一起,并將每條重鏈與一條輕鏈連接在一起。這些鏈的特定結(jié)構(gòu)和組合使抗體分子能夠同時與多個細(xì)胞結(jié)合。抗體分子的不同部分可以與多種抗原以及一些效應(yīng)分子結(jié)合。抗體的可變區(qū)或V區(qū)表示/指Y結(jié)構(gòu)的兩個臂,該區(qū)域可以與抗原結(jié)合。相反,Y結(jié)構(gòu)的莖稱為恒定區(qū)或C區(qū),它只能與有限數(shù)量的效應(yīng)細(xì)胞和分子結(jié)合。
抗體

  一抗和二抗區(qū)別

  一抗
  可以與特定蛋白質(zhì)或目標(biāo)生物分子結(jié)合的抗體稱為一抗。一抗以動物物種(例如大鼠、小鼠、山羊和兔子)為宿主,制成單克隆抗體(mAbs)或多克隆抗體(pAbs)。MAbs或pAbs各有優(yōu)缺點,在選擇一抗之前需要考慮這些優(yōu)點和缺點。MAbs是由動物的單個B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的,因此僅針對抗原的一個表位。PAbs是由動物的多個B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的,具有針對抗原的多個表位的異質(zhì)抗體混合物。MAbs非常適合相同的生產(chǎn)和標(biāo)準(zhǔn)化實驗,并且產(chǎn)生最少或沒有背景染色。使用mAb時,與不需要的蛋白質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng)的可能性也會降低。
  由于多抗可以結(jié)合單一抗原的多個表位,因此它們能夠識別抗原的微小變化。它們還能產(chǎn)生更強的抗原檢測信號。因此,它們是涉及變性蛋白質(zhì)的實驗的理想選擇。一抗以不同的粗制和純化形式開發(fā)和供應(yīng)。它們可用于檢測糖尿病、癌癥、阿爾茨海默氏癥和帕金森氏癥的生物標(biāo)志物。
  二抗
  二抗與直接附著于靶抗原的一抗結(jié)合。一抗的V區(qū)與抗原結(jié)合后,標(biāo)記的二抗將其V區(qū)附著于一抗的莖或C區(qū)。利用這種相互作用,二抗可以間接幫助檢測和純化靶蛋白(抗原)。二抗在標(biāo)記和檢測方面更靈敏、更靈活,因此,它們可用于流式細(xì)胞術(shù)、蛋白質(zhì)印跡和細(xì)胞成像等一系列應(yīng)用中的一抗比色、化學(xué)發(fā)光和熒光檢測。
  二抗類型的選擇取決于一抗的類別——免疫球蛋白IgG或IgM、首選標(biāo)記類型和來源宿主。由于大多數(shù)一抗都是使用少數(shù)宿主物種開發(fā)的,并且大多數(shù)一抗屬于IgG類,因此制造商通常會提供可用于多種不同檢測程序和系統(tǒng)的即用型二抗。常用的二抗示例有抗兔IgG、抗鼠IgG、抗雞IgG或抗山羊IgG。所選的二抗應(yīng)始終能夠識別產(chǎn)生一抗的宿主物種,例如,為了檢測由小鼠產(chǎn)生的一抗,使用抗鼠二抗。特定測定的最佳二抗還取決于標(biāo)記類型。在ELISA和蛋白質(zhì)印跡中,標(biāo)記通常是化學(xué)發(fā)光、比色或基于熒光的,但在流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光中,僅使用熒光標(biāo)記。對于所有這些檢測來說,結(jié)合的二抗都是理想的。
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