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ELISA是什么檢測(cè)方法?一文讀懂ELISA檢測(cè)

  ELISA簡(jiǎn)稱酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)是一種免疫測(cè)定方法,檢測(cè)者可以利用ELISA試劑盒量化樣品中特定目標(biāo)水平。ELISA在多個(gè)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用,例如生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、食物和環(huán)境科學(xué)檢測(cè)等等。ELISA是什么檢測(cè)方法?在本文中上海紀(jì)寧生物從以下幾個(gè)方面為您詳細(xì)介紹。

  目錄

  1什么是ELISA

  2Elisa檢測(cè)方法

  3Elis的應(yīng)用

  什么是ELISA

  文章開頭介紹ELISA是一種免疫測(cè)定方法,它是基于板檢測(cè)技術(shù)。ELISA利用特異性抗體(或抗原)捕獲樣品中的目標(biāo)抗原(或抗體),并利用酶和底物的反應(yīng)檢測(cè)/定量目標(biāo)分子方法。

  根據(jù)抗原抗體組合,該檢測(cè)稱為直接ELISA、間接ELISA、夾心ELISA和競(jìng)爭(zhēng)ELISA

  ELISA檢測(cè)方法

  直接ELISA

  在直接ELISA法中,將已知抗原以特異性方式直接吸附在酶標(biāo)板上,通過添加酶標(biāo)記抗體,該抗體能特異性結(jié)合在目標(biāo)抗原,然后加入底物,與酶標(biāo)記抗體結(jié)合的酶會(huì)催化底物產(chǎn)生顏色或熒光信號(hào),這一信號(hào)的強(qiáng)度與抗原的量成正比,從而可以定量分析抗原的濃度。

  間接ELISA

  將已知抗原以特異性方式直接吸附在酶標(biāo)板上,將含有抗體的樣品添加到抗原包被的孔中,以與抗原結(jié)合。然后加入酶標(biāo)二抗特異性結(jié)合一抗,在加入特定的底物,酶標(biāo)記的二抗催化底物產(chǎn)生顏色變化。通過酶標(biāo)儀測(cè)量吸光度,從而定量分析樣品中抗原的抗體水平。

  間接ELISA之所以多出一個(gè)步驟,是因?yàn)樗昧硕箒黹g接標(biāo)記樣品中的一抗,這不僅提高了檢測(cè)的靈活性(因?yàn)椴煌囊豢箍梢怨灿猛环N酶標(biāo)二抗),而且通常能提高檢測(cè)的靈敏度,因?yàn)樗试S更多的抗體參與反應(yīng),從而放大信號(hào)。

  ELISA夾心法

  ELISA夾心法將抗原夾在抗體之間,將一種針對(duì)目標(biāo)抗原特定表位的抗體固定在微孔板的表面上,將含有抗原的樣品加入到孔中并清洗以去除游離抗原。然后加入與抗原上另一個(gè)表位結(jié)合的酶聯(lián)二抗。將酶特異性底物添加到平板上,酶催化底物產(chǎn)生顏色變化或熒光,這一信號(hào)的強(qiáng)度與最初樣本中抗原的量成正比,從而實(shí)現(xiàn)抗原的定量檢測(cè)。

  競(jìng)爭(zhēng)ELISA

  競(jìng)爭(zhēng)性ELISA的微孔板會(huì)預(yù)先包被與目標(biāo)抗原具有特異性的抗體,樣本中的未標(biāo)記抗原與酶標(biāo)記的已知濃度的抗原(標(biāo)記抗原)同時(shí)加入到這些孔中。使兩者競(jìng)爭(zhēng)與固相上的抗體或抗原結(jié)合位點(diǎn)。加入底物,酶催化底物產(chǎn)生顏色變化。顏色越淺,表明樣本中的抗原濃度越高,因?yàn)楦嗟臉?biāo)記抗原被競(jìng)爭(zhēng)掉。

  上述是實(shí)驗(yàn)室常用的ELISA檢測(cè)方法,每個(gè)檢測(cè)方法都有各自特點(diǎn),具體使用哪種方法要結(jié)合自己的實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)以及樣本檢測(cè)。接下來,我們了解下ELISA具體應(yīng)用。

  Elisa應(yīng)用

  ELISA是一種免疫學(xué)檢測(cè),在基礎(chǔ)科學(xué)研究、臨床研究和診斷中有著廣泛的用途。

  生物醫(yī)學(xué)研究:

  ELISA是一種有效的技術(shù),不僅在一般的生物醫(yī)學(xué)研究中很有價(jià)值,而且可作為診斷工具。它可以檢測(cè)出各種類型的極低水平和數(shù)量的生物分子。盡管存在局限性,但ELISA仍然是基礎(chǔ)研究中的重要工具,并在過去幾十年中改變了生物醫(yī)學(xué)研究。

  ELISA在生物醫(yī)學(xué)研究中的一些應(yīng)用方式:

  蛋白質(zhì)定量: ELISA通常用于定量樣本中特定蛋白質(zhì)的含量。這可以幫助研究人員了解細(xì)胞和組織中蛋白質(zhì)的表達(dá)和調(diào)控。

  抗體檢測(cè): ELISA用于檢測(cè)和量化生物樣本(如血清或血漿)中的抗體。這有助于了解免疫系統(tǒng)如何對(duì)病原體或疫苗作出反應(yīng)。

  藥物研發(fā): ELISA可用于篩選大量化合物庫,以確定其與特定蛋白質(zhì)的結(jié)合能力。這有助于識(shí)別潛在的候選藥物以供進(jìn)一步開發(fā)。

  生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn):生物標(biāo)志物是可用于指示疾病的存在、嚴(yán)重程度或進(jìn)展的分子。這可以幫助科學(xué)家檢測(cè)和測(cè)量某些生物標(biāo)志物,這些生物標(biāo)志物有可能幫助診斷、監(jiān)測(cè)和治療疾病。

  臨床診斷:

  ELISA是臨床環(huán)境中廣泛使用的診斷工具。它可以檢測(cè)血液或其他體液中是否存在特定抗體或抗原,因此可用于診斷多種疾病。該檢測(cè)可作為診斷急性感染的替代工具,并且適合在資源有限的環(huán)境中篩查大量樣本。基于ELISA的傳染性血清學(xué)是準(zhǔn)確診斷和預(yù)后最可靠的方法之一。目前已開發(fā)并上市了多種用于檢測(cè)傳染性病原體的先進(jìn)檢測(cè)方法。

  ELISA在臨床診斷中的一些應(yīng)用方式包括:

  傳染病診斷: ELISA通常用于診斷由細(xì)菌、病毒和其他病原體引起的傳染病。例如,ELISA可以檢測(cè)人體對(duì)病原體產(chǎn)生的抗體,表明當(dāng)前或過去的感染。ELISA用于診斷HIV /AIDS、乙型肝炎和丙型肝炎、萊姆病和梅毒等疾病。

  過敏測(cè)試: ELISA可用于檢測(cè)免疫系統(tǒng)對(duì)花粉、塵螨或食物等過敏原產(chǎn)生的特定IgE抗體。ELISA可幫助診斷過敏并確定引起癥狀的過敏原。

  自身免疫性疾病診斷: ELISA用于檢測(cè)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的攻擊人體自身組織的自身抗體。ELISA可用于診斷狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和多發(fā)性硬化癥等自身免疫性疾病。

  癌癥診斷: ELISA可用于檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物,即癌細(xì)胞產(chǎn)生的物質(zhì),可在血液或其他體液中找到。ELISA可幫助診斷某些類型的癌癥,例如前列腺癌和卵巢癌。

  藥物水平監(jiān)測(cè): ELISA可用于監(jiān)測(cè)血液中的藥物水平,以確保藥物處于治療水平且無毒性。ELISA還可用于通過測(cè)量尿液中的藥物或其代謝物的水平來檢測(cè)藥物濫用。

  食品安全檢測(cè):

  ELISA用于識(shí)別食品中存在的過敏原、病原體和其他污染物。這是一種廉價(jià)而快速的方法,可用于篩選大量食品樣本以進(jìn)行質(zhì)量控制和安全目的。ELISA也是牛奶、魚、轉(zhuǎn)基因食品、輻照食品或其他可能影響人類健康的危險(xiǎn)食品成分(如牛海綿狀腦病)質(zhì)量控制的重要技術(shù)。

  ELISA用于食品安全檢測(cè)的許多不同領(lǐng)域,包括食源性病原體的檢測(cè)、食品加工和生產(chǎn)的監(jiān)控以及進(jìn)口食品的篩查。

  上述為大家介紹了ELISA及檢測(cè)方法,通過上述了解,相信您對(duì)ELISA有個(gè)認(rèn)識(shí)。紀(jì)寧生物為支持大家科研,我們有科研使用ELISA試劑盒,歡迎前來選購!

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