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產品詳情

英文名稱 : Creatine Kinase(CK) Activity Assay Kit
產品包裝 : 盒裝
產品規格 : 50T/48S
儲存條件 : -20℃
檢測方法 : 微量法
有 效 期  : 6個月
推    薦   : 若使用96孔板測定,需使用96孔UV板

產品組成:

試劑名稱

規格

保存條件

提取液

液體110 mL×1瓶

4℃保存

試劑一

粉劑×1瓶

-20℃保存

試劑二

粉劑×1支

-20℃保存

試劑三

粉劑×1支

-20℃保存

試劑四

粉劑×1支

-20℃保存

試劑五

液體5 mL×1瓶

4℃保存


產品說明:
肌酸激酶(Creatine Kinase,CK) (EC 2.7.3.2)也成為肌酸磷酸激酶,主要存在于心臟、肌肉以及腦等組織中,能可逆地催化肌酸與ATP之間的轉磷?;磻?,是一個與細胞能量運轉、肌肉收縮、ATP再生有直接關系的重要激酶。

CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP與葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化6-磷酸葡萄糖與NADP+生成NADPH,導致340nm光吸收值增加,以此來表示CK酶活。

注意:
實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品:
天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔UV板、恒溫水浴鍋、研缽/勻漿器、蒸餾水。

注意事項:
1. 血清的CK不穩定,采集樣本后盡快測定,4℃避光保存可穩定24h。
2. 樣本蛋白質含量需要另外測定。
3. OD值大于0.6可用提取液適當稀釋樣本,并在計算公式中相應的改變稀釋倍數。
4. ΔA 空白管一般不超過0.01.

實驗實例:
1、取0.1g小鼠腦加入1mL提取液進行勻漿研磨,取上清后再用提取液稀釋8倍,之后按照測定步驟操作,用微量石英比色皿測得計算ΔA測定管=A2測定-A1測定=0.4175-0.1314=0.2861,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.1304-0.1256=0.0048,ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.2861-0.0048=0.2813,按組織樣本質量計算得:
CK活性(U/g質量)=268×ΔA÷W×8(稀釋倍數)=268×0.2813÷0.1×8(稀釋倍數)=6031.072 U/g 質量。

2、取兔血清直接檢測,用微量石英比色皿測得計算ΔA測定管=A2測定-A1測定=0.5761-0.4649=0.1112,ΔA空白管
=A2空白-A1空白=0.1304-0.1256=0.0048,ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.1112-0.0048=0.1064,按血清體積計算得:
CK活性(U/mL)=268×ΔA=268×0.1064=28.5152 U/mL。
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