英文名稱 ：Methemoglobin (MetHb) Content Assay Kit
產(chǎn)品包裝 ：盒裝
產(chǎn)品規(guī)格 ：50T/48S
儲存條件 ：2-8℃
檢測方法 ：可見分光光度法
有 效 期 ：6個(gè)月
產(chǎn)品組成：
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試劑名稱
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規(guī)格
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保存條件
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試劑一
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液體50 mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑二
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液體60mL×1瓶
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2-8℃保存
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標(biāo)準(zhǔn)品
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粉劑×1支
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2-8℃保存
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產(chǎn)品說明：
高鐵血紅蛋白(Methemoglobin ，MetHb)為血紅蛋白的氧化物，是血紅蛋白分子內(nèi)的亞鐵離子被氧化成三價(jià)鐵離子形成的。血紅蛋白具有攜氧能力，氧化后的高鐵血紅蛋白失去攜氧能力，測定高鐵血紅蛋白含量可以衡量血液及紅細(xì)胞代用品攜氧能力，其測定方法對臨床診斷高鐵血紅蛋白血癥和研制紅細(xì)胞代用品具有重要意義。
血紅蛋白與氧結(jié)合形成氧合血紅蛋白，脫氧后為脫氧血紅蛋白，分別測定氧合血紅蛋白、脫氧血紅蛋白和高 鐵血紅蛋白在560nm、576nm 、630nm處的吸光值，利用各組分在特定波長的消光系數(shù)，可計(jì)算各組分的質(zhì)量濃度 百分比，再測出樣本的總血紅蛋白含量， 即可計(jì)算得到樣本的高鐵血紅蛋白含量。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。 如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、冰和蒸餾水。
注意事項(xiàng)：
1. 如果A總大于1.0，建議將樣本用蒸餾水稀釋后進(jìn)行測定，計(jì)算公式中注意同步修改。
2. 如果A總小于0.01 或接近空白管吸光值，可適當(dāng)增大樣本量，空白管和標(biāo)準(zhǔn)管也需要進(jìn)行相應(yīng)調(diào)整。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
1. 將兔紅細(xì)胞，用蒸餾水稀釋100倍后測定總血紅蛋白含量，不稀釋直接測定A560 、A576 、A630 ，用1mL玻璃比色皿測得并計(jì)算 ΔA 總=A總-A 空白=0.537-0.007 =0.530 ，ΔA 標(biāo)準(zhǔn)= A標(biāo)準(zhǔn)-A 空白=0.369-0.007=0.362；A560=0.741 ，A576=1.218 ，A630=0.104；計(jì)算：
(1)總血紅蛋白含量(mg/mL)= 0.625×ΔA總÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×F=91.51 mg/mL
(2)MetHb(%)=0.2380÷(0.2380+0.6509+0.0329)×100%=25.82%
(3)高鐵血紅蛋白含量(mg/mL)=總血紅蛋白含量×MetHb(%)=23.627mg/mL
2. 將兔全血，用蒸餾水稀釋160倍后測定總血紅蛋白含量，不稀釋直接測定A560 、A576 、A630 ，用1mL玻璃比色皿測得計(jì)算ΔA 總=A總-A空白= 0.570-0.007 =0.563 ，ΔA 標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.369-0.007=0.362； A560=1.111 ，A576=1.650 ，A630=0.072 ，
計(jì)算：
(1)總血紅蛋白含量(mg/mL)= 0.625×ΔA總÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×F=155.525 mg/mL
(2)MetHb(%)=0.084÷(0.2402+0.8292+0.0840)×100%=7.283%
(3)高鐵血紅蛋白含量(mg/mL)=總血紅蛋白含量×MetHb(%)=11.33mg/mL
3. 將小鼠全血，用蒸餾水稀釋160倍后測定總血紅蛋白含量，不稀釋直接測定 A560 、A576 、A630 ，用1mL玻璃比色皿測得并計(jì)算ΔA總=A總-A空白= 0.787-0.007=0.780 ，ΔA 標(biāo)準(zhǔn)= A標(biāo)準(zhǔn)-A 空白=0.369-0.007=0.362；A560=1.518 ，A576=1.821 ，A630=0.373 ，
計(jì)算：
(1)總血紅蛋白含量(mg/mL)= 0.625×ΔA總÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)×F=215.47 mg/mL
(2)MetHb(%)=0.8201÷(0.4564+0.5931+0.8201)×100%=43.86%
(3)高鐵血紅蛋白含量(mg/mL)=總血紅蛋白含量×MetHb(%)=95.51mg/mL
