小鼠視網膜微血管周細胞

品牌：紀寧生物

貨號：JN25781

規格： 5×10?Cells

聯系方式：021-54721350

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產品詳情

小鼠視網膜微血管周細胞
基本信息
產品名稱：小鼠視網膜微血管周細胞
產品品牌：紀寧生物
組織來源：視網膜組織
產品規格：5×105cells/T 25細胞培養瓶

細胞簡介

小鼠視網膜微血管周細胞分離自視網膜組織。視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。

視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用。后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。第一神經元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節細胞，約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相聯系，負責聯絡作用。第三層叫節細胞層，專管傳導。

視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面，經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的，在黃斑
區，其分辨能力最強。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用，在視網膜血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。

周細胞(pericyte) 又稱R ouget細胞和壁細胞，是一種包圍全身毛細血管和靜脈中內皮細胞的細胞，可以收縮。周細胞嵌入毛細血管內皮細胞的基膜中，通過物理接觸和旁分泌信號與內皮細胞進行細胞通訊，監視和穩定內皮細胞的成熟過程。此外，周細胞還具有調控毛細血管血流量、細胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用，其多功能性是目前研究的熱點之一，所以對血管周細胞的生物學特征、標記物、細胞功能等的研究都為相關研究提供基礎資料。

周細胞產生手指狀的外延以調控毛細血管的血流量。周細胞和內皮細胞之間共同擁有一個基膜，基膜上有多種細胞連接，包括多種整合素、神經鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細血管直徑的雙向調控。毛細血管受損時，周細胞還可增殖，分化為內皮細胞和成纖維細胞。

方法簡介

紀寧生物實驗室分離的小鼠視網膜微血管周細胞采用中性蛋白酶-膠原酶聯合消化法制備而來制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

質量檢測

紀寧生物實驗室分離的小鼠視網膜微血管周細胞經α-SM A 免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率：每3-4天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳1-2代左右
傳代比例：1:2
消化液：0. 25% 胰蛋白酶
培養條件：氣相：空氣，95% 。C O2，5%
小鼠視網膜微血管周細胞體外培養周期有限。建議使用紀寧生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。

細胞培養狀態

發貨時發送細胞電子版照片

使用方法

小鼠視網膜微血管周細胞是一種貼壁細胞，細胞形態呈成纖維細胞樣，在紀寧生物技術部標準操作流程下，細胞可傳1-2代左右。建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作

1. 取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液，1000rpm ，離心5min，保留沉淀。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液0. 5m L至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min (或4℃冰箱靜置5-7min) 。消化完向離心管內加入5ml完全培養基終止消化。
3) 經1000rpm ，離心5min，丟棄上清，用5ml完全培養基(補加1% FBS，促進貼壁) 重懸沉淀，接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基(37℃預熱) 。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚賴氨酸PLL（0. 1m g/m l），明膠（0. 1% ），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

小鼠視網膜微血管周細胞

注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和紀寧生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們紀寧聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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小鼠視網膜微血管周細胞

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