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大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞

品牌:紀(jì)寧生物

貨號:JN25644

規(guī)格: 5×10?Cells

聯(lián)系方式:021-54721350

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產(chǎn)品詳情

大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品名稱 :大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 :紀(jì)寧生物
組織來源 :肺小動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡介

大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞分離自肺小動脈組織;小動脈(sm allartery), 管 徑 在 0.3~ 1mm 之間,小動脈包括粗細(xì)不等的幾級分支,也屬肌性動脈。較大的小動脈,內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,一般沒有外彈性膜。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)”。典型的小動脈,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。

中膜的肌層相對比其他動脈為厚,當(dāng)平滑肌在神經(jīng)支配下強力收縮時,其管腔可以完全閉塞,而使血液不能流入它所分布的毛細(xì)血管內(nèi),從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力。如果有許多小動脈同時收縮,可使血壓顯著上升。反之,當(dāng)小動脈的平滑肌舒張時,則可使大量的血液流入毛細(xì)血管,外周阻力明顯下降,血壓降低。

終末小動脈(terminalarteri-ole)的口徑為20~30μm ;后小動脈(m etar-te riole),又稱毛細(xì)血管前小動脈(p recapil-lary arteriole)的口徑為12~15μm 。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌,在毛細(xì)血管前小動脈分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛細(xì)血管前括約肌(p recapillary sphinc-ter),其收縮或舒張,可調(diào)節(jié)真毛細(xì)血管的血流量,是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關(guān)”。


方法簡介

紀(jì)寧生物實驗室分離的大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞采用中性蛋白酶-膠原紀(jì)寧合消化法制備而來制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶 。


質(zhì)量檢測

紀(jì)寧生物實驗室分離的大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SM A 免疫熒光鑒定,純度可達9 0% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 :  含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :  每2-3天換液一次
生長特性 :  貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣 傳代特性 可傳2-3代 傳代比例 1:2
消 化 液 :  0.25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :  氣相:空氣,95% ;C O2,5%
大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用紀(jì)寧生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片


使用方法

大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈成纖維細(xì)胞樣,在紀(jì)寧生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳2-3代;建議您收到細(xì)胞后盡快進行相關(guān)實驗。


客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進行操作

1.取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4)待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞實驗
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l),明膠(0.1% ),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


大鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞

注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和紀(jì)寧生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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