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卡托普利片為抗高血壓藥物，是血管緊張素轉化酶抑制劑，臨床上被廣泛應用，屬于國家基本藥物目錄品種。制劑中卡托普利二硫化物(簡稱二硫化物)是一種已知雜質，目前行業內普遍采用《中國藥典》規定的高效液相色譜法測定，外標法定量。按照《中國藥典》中的色譜條件測定卡托普利二硫化物出峰慢、峰形差、理論板數低、使用大粒徑填料、耗時、難以快速定量，即使采用梯度洗脫也需運行35min，還會導致基線波動，影響準確定量，而且梯度洗脫較等度洗脫重現性差。
目前中國藥典中藥品快速檢驗技術不斷增加，在測定卡托普利片中卡托普利二硫化物時需要有效手段快速分離卡托普利二硫化物并準確定量。超高效液相色譜法在藥物分析、食品檢測、環境監測等方面的研究已有不少報道，但目前還未見采用超高效液相色譜法測定卡通托普利中卡托普利二硫化物的報道。
對稱性二硫化物在自然界中廣泛存在，主要用于生物醫藥、工業生產和儲能材料等領域。卡托普利二硫化物是抗高血壓藥物卡托普利的合成中間體，主要用于制備成品藥和科學研究。對稱性二硫化物的合成及其巰基化的方法多種多樣有研究學者用五水合硫代硫酸鈉和九水合硫化鈉為原料來合成卡托普利二硫化物，并進一步用鋅粉和硫酸將其巰基化從而得到卡托普利，迄今為止這一方案的具體實驗條件尚未得到進一步研究。
(1)、卡托普利二硫化物的檢查：精密稱取復方卡托普利片的細粉適量，約相當于卡托普利片30mg，置50ml置瓶中，加流動相適量，超聲處理10分鐘，放冷，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液，另取卡托普利二硫化物對照品，精密稱定，加甲醇適量溶解，用流動相定量稀釋制成每1ml中約含10μg的溶液，作為對照品溶液；供試品溶液的色譜圖中如有與卡托普利二硫化物保留時間一致的色譜峰，按外標法以峰面積計算，不得過卡托普利標示量的3.5％；
(2)、卡托普利二硫化物含量均勻度的檢查：取復方卡托普利片2片，至100ml量瓶中，加流動相適量，超聲處理使溶解，放冷，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取卡托普利片與氫氧噻嗪對照品，精密稱定，加流動相溶解并定量稀釋制成每1ml約含卡托普利片0.02mg與氫氧噻嗪0.07mg的混合溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；按外標法以峰面積計算測定得出結果，應符合中國藥典2000年版附錄XE的規定；
(3)、卡托普利二硫化物溶出度的檢查：取復方卡托普利片，按照溶出度測定法如中國藥典2000年版附錄XC的第一法，以0.02mol/L稀鹽酸1000ml為溶出介質，轉速為每分鐘110轉，經過40分鐘，取溶液15ml，濾過，取續濾液作為供試品溶液，精密量取供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取卡托普利片與氫氧噻嗪對照品適量，用溶出介質溶解并定量稀釋制成每1ml約含卡托普利片20μg與氫氧噻嗪6μg的混合溶液，作為對照品溶液，同法測定得到色譜圖；按外標法以峰面積計算每片卡托普利片與氫氧噻嗪的溶出量，限度均為標示量的75％，應符合規定。
方法一：卡托普利二硫化物為卡托普利生產過程中的伴隨雜質：
在1000ml三口瓶中加入50g游離酸、200g水、66g氨水。控制溫度35℃保溫反應2小時。反應結束，控制在此溫度下滴加鹽酸102g，直至pH至0.5，攪拌30分鐘復測pH。加入3g鋅粉，加熱升溫到38℃，保溫反應2h。反應完成后降至室溫用300g二氯甲烷分三次萃取。合并有機相，常減壓蒸餾二氯甲烷。蒸干后用80g乙酸乙酯重結晶，升溫至70℃溶清，緩慢降溫至5℃結晶。抽濾，減壓烘干。得卡托普利33g。
經過檢測，滿足2015版《中國藥典》的標準。其中，產物的熔點為105～108℃（藥典標準104～110℃），比旋度為-126～130°（藥典標準-126～132°），二硫化物為0.2%（藥典標準小于1%）。純度在99.6%以上。
方法二：
首先，制備卡托普利二硫化物的原料藥1-(3-溴-2-D-甲基丙酰基)-L-脯氨酸。異丁烯酸經加成、氯化和酰胺化反應后，拆分析出1-(3-溴-2-D-甲基丙酰基)-L-脯氨酸二環己胺鹽，溶于硫酸氫鉀溶液中，室溫水解1.5h，乙酸乙酯萃取3次，濃縮，重結晶，得到原料藥。對二環己胺鹽在硫酸氫鉀中水解溫度進行了考察，發現升溫水解后，萃取時會發生乳化現象，所以確定在室溫下延長反應時間至1.5h。
其次，原料藥依次與碳酸氫鈉、五水合硫代硫酸鈉和九水合硫化鈉反應后鹽酸酸化固化，烘干，得到卡托普利二硫化物粉末。本文對回流時間、九水合硫化鈉的溶液濃度和投料比等反應成敗的關鍵因素進行了考察。實驗結果顯示：75℃回流2.5小時，配置37.3%九水合硫化鈉溶液，按羧酸:九水合硫化鈉=1:0.62（摩爾比）反應，可成功得到卡托普利二硫化物，產率97.84%。
最后，在保護氣氛中，卡托普利二硫化物與鋅粉和稀硫酸發生巰基化反應得到卡托普利。通過正交試驗，建立HPLC分析方法，正交試驗得到的產物經HPLC分析后，確定最佳條件：1mol/LH2SO4，反應時間3小時，投料摩爾比為卡托普利二硫化物:鋅粉:硫酸=1:10.5:6.5，產率84.74%。經上述條件優化后，卡托普利二硫化物的制備和巰基化兩步反應作為制備卡托普利的關鍵步驟，綜合產率為82.91%，操作簡單，對溴代路線制備卡托普利的工業化具有指導性意義。
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