577-38-8 / 黃諾馬苷的人工抗原制備方法

背景及概述^[1]

兩色金雞菊(Coreopsistinctoria)又名昆侖雪菊，為菊科金雞菊屬的野生草本植物，始載于《新華本草綱要》。其頭狀花序在維吾爾醫(yī)醫(yī)院常作為一種民族藥材進(jìn)行使用，具有活血化瘀、和胃健脾、降壓降脂等作用。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，兩色金雞菊的主要活性成分為黃酮類化合物，對其黃酮類化合物的研究現(xiàn)已從最初的提取物研究階段深入到具體的單體成分研究階段。黃諾馬苷全稱為異奧卡寧7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，是從兩色金雞菊乙醇提取物中分離得到的一種二氫黃酮類化合物，被認(rèn)為是該藥材的有效成分之一，其藥理作用廣泛，但目前關(guān)于黃諾馬苷單體的體內(nèi)外藥代動力學(xué)研究并不多見。

人工抗原的制備^[2]

1）采用高碘酸鈉氧化法將黃諾馬苷和牛血清白蛋白（ＢＳＡ）進(jìn)行偶聯(lián)，其原理是將糖基上的鄰二羥基結(jié)構(gòu)氧化為醛基，醛基再與蛋白上的氨基結(jié)合得到穩(wěn)定的以碳－氮單鍵連接的結(jié)合物，從而實(shí)現(xiàn)了黃諾馬苷與載體蛋白的偶聯(lián)。薄層結(jié)果顯示偶聯(lián)成功，但免疫小鼠后，間接競爭ＥＬＩＳＡ結(jié)果顯示小鼠血清對小分子無特異性，分析其原因可能由于高碘酸鈉在氧化糖基上鄰二羥基結(jié)構(gòu)的同時(shí)破壞了黃諾馬苷分子中其他鄰二羥基結(jié)構(gòu)，也有可能ＢＳＡ的結(jié)構(gòu)不易暴露氨基等等。

2）采用曼尼希法合成黃諾馬苷人工抗原，將黃諾馬苷與更易暴露氨基的載體蛋白多聚賴氨酸偶聯(lián)。經(jīng)薄層色譜法檢測，偶聯(lián)物不隨展開劑展開，而停留在點(diǎn)樣原點(diǎn)，顯現(xiàn)出蛋白特征，但經(jīng)顯色劑處理后，在點(diǎn)樣處可見明顯色斑，與黃諾馬苷對照品的顏色一致，說明停留在原點(diǎn)的偶聯(lián)物同時(shí)又具有小分子的特征，由此可見，黃諾馬苷與載體蛋白偶聯(lián)成功。

主要參考資料

[1] 黃諾馬苷在MDCK單層細(xì)胞模型上的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制分析

[2] 黃諾馬苷人工抗原合成及鑒定