3949-36-8 / 3-乙酰基羥基香豆素的應用

背景及概述^[1][2]

香豆素具有較大的摩爾消光系數和量子產率，是很重要的綠色熒光染料，經過修飾后用于發光材料、化學傳感器以及標記生物分子。近幾年利用熒光增強效應檢測活體細胞中半胱氨酸的研究得到不斷發展。3-乙酰基羥基香豆素又稱為3-乙酰香豆素；8-乙酰-6,7-二甲氧基香豆素，常溫下為白色固體具有特殊香味，常用為醫藥和化學合成中間體，與此同時，3-乙酰基羥基香豆素作為香豆素衍生物中重要的代表，被廣泛應用于熒光探針檢測中，具有價格低廉，靈敏度高等優點。

3-乙酰基羥基香豆素

應用^[3]

1.高選擇性高靈敏識別汞離

制備方法：將300mg(1.47mmol)3-乙酰基羥基香豆素溶于15mL二氯甲烷中，再加入508mg(3mmol)硫代氯甲酸苯酯常溫攪拌4h，然后利用旋蒸儀進行旋蒸過柱，得到粗產品。如果要得到較純的產品，可以將其過柱然后在二氯甲烷和石油醚的混合體系(例如v/v，1:10)中進行重結晶得到純品。得到白色純凈產品210mg，產率為42％。

伴隨著探針溶液中Hg2+濃度的增加，熒光強度逐漸增強，且在(0-2μM)Hg2+濃度范圍內，Hg2+的濃度與熒光強度成很好的線性關系。說明探針對汞離子有很好的響應，該探針能實現對汞離子的靈敏識別。我國飲用水標準中汞離子的標準限值為0.001mg/L因此，本探針能較精確地確定待測樣本中汞離子的含量。

2.半胱氨酸熒光探針

由2，4-二羥基苯甲醛與乙酰乙酸乙酯反應得到3-乙酰基羥基香豆素，然后與丙烯酰氯反應得到2-(3-乙酰基)香豆素基丙烯酸酯。生成的2-(3-乙酰基)香豆素基丙烯酸酯可以與半胱氨酸發生邁克加成環化反應，釋放出有熒光的3-乙酰基-7-羥基香豆素，從而實現檢測。

將2，4-二羥基苯甲醛（1，20mmol），乙酰乙酸乙酯（24mmol）和1mL哌啶加入到30mL無水乙醇中，加熱至回流，反應3小時后冷至室溫，有綠色固體析出，抽濾，乙醇洗三次，粗產品用乙醇重結晶得到淡綠色固體2，熔點：237℃，產率91%。

紅外測定(KBr，cm-1):3482(O-H)，3050(Ar-H)2928(=CH)，1678(C=O)，1620(C=C)，1211(C-O-C)。

在37℃條件下，將1μM的2-(3-乙酰基)香豆素基丙烯酸酯分別加入到不同濃度的牛血清溶液（0,0.01,0.05,0.2,0.5,1）中培養20分鐘。熒光酶標儀檢測熒光強度，結果顯示2-(3-乙酰基)香豆素基丙烯酸酯可成功的應用于生物液體中，且血清濃度越大，熒光越強。

主要參考資料

[1] 鄧正江, & 林紅梅. (2005). 3-乙酰基-5-羥甲基-7-羥基香豆素治療病毒性肝炎高膽紅素血癥37例. 蚌埠醫學院學報, 30(6), 553-553..

[2] 蔣德爐, 朱廣軍, 鄧汝溫, & 吳集貴. (1995). 3—乙酰乙酰基—4—羥基香豆素希土配合物的合成和性質. 無機化學學報, 11(1), 15-18.

[3] 張珍英, 鄧慧敏, & 鄧芹英. (2008). 香豆素類新基質用于基質輔助激光解吸/電離飛行時間質譜對聚乙二醇的測定. 分析測試學報, 27(11), 1225-1228.