315-22-0 / 野百合堿的藥效學(xué)及制備

背景及概述^[1][2]

野百合堿屬吡咯里西丁類生物堿，又稱豬屎豆堿、農(nóng)吉利甲素、野百合胺、烏沙拉明，為吡咯西丁二醇和二元酸形成的環(huán)酯，是一種大環(huán)二酯型雙稠吡咯啶類生物堿。野百合堿為中強堿性生物堿，是白色棱柱結(jié)晶，不溶于石油醚，微溶于苯或水，略溶于乙醚或丙酮，可溶于無水乙醇或甲醇，易溶于氯仿。野百合堿對小鼠肉瘤-180、白血病L615、大鼠瓦克癌-256等均有一定的抑制作用（接種后24小時開始治療），其中以對瓦克癌-256療效最為顯著。另有報告，對S37抑制率為54～75%。如在野百合堿母核氮原子上引入氧原子，毒性可降低，但對肉瘤-180的抑制率亦隨之降低。臨床試用于皮膚癌及子宮癌有較好的療效，對白血病亦有一定效果。此生物堿為雙稠吡咯啶類，其抗癌作用與烷化劑相似。

結(jié)構(gòu)

藥效學(xué)^[3]

本品對多種腫瘤有抑制作用，屬烷化劑，通過對DNA的烴化作用而發(fā)揮抗癌效應(yīng)。其主要用于皮膚癌的局部治療，也用于基底細胞癌、宮頸癌、陰莖癌及白血病等。

藥動學(xué)^[3]

給藥后主要分布于肝、腎、胃等器官組織，24h大部分藥物從尿中以原型排出體外，在肝臟中存留時間較長。

毒性機制^[1]

在雙稠吡咯啶類化合物的結(jié)構(gòu)中，雙稠吡咯啶環(huán)1，2位的雙鍵、伯羥基酯化的烯丙酯基團是抗腫瘤的活性部位，肝毒性生物堿的特點是1，2位雙鍵存在于雙稠吡咯啶環(huán)上，而在酯酰基的α位上，常帶有位阻較大的基團，因此其抗癌作用和肝臟毒性是分不開的。如果l，2位雙鍵飽和，即失去烯丙酯基團，在消除肝毒性的同時，也失去了抗癌活性。

研究發(fā)現(xiàn)，農(nóng)吉利甲素單體對肺無作用，而離體灌注農(nóng)吉利甲素代謝物后則能產(chǎn)生肺毒性的化學(xué)物質(zhì)，這也就為農(nóng)吉利甲素代謝物產(chǎn)生肺毒性提供了直接證據(jù)。農(nóng)吉利甲素在紅細胞中的保留表明，紅細胞可能是將農(nóng)吉利甲素代謝物運到其它器官的運載體，這可能是導(dǎo)致肺毒性的一個因素。吉利甲素引發(fā)肺動脈高壓與一氧化氮的低生物利用度有關(guān)。因此，實驗人員先給大鼠服用農(nóng)吉利甲素和L精氨酸（一氧化氮的前導(dǎo)物），兩星期后評估一氧化氮合酶信使RNA、內(nèi)皮型一氧化氮合酶蛋白、環(huán)鳥甘酸和巰基化平（氧化應(yīng)激指示劑）。

結(jié)果表明，農(nóng)吉利甲素不改變內(nèi)皮型一氧化氮合酶信使RNA或內(nèi)皮型一氧化氮合酶蛋白在肺部的表達，而導(dǎo)致巰基化水平降低。因此，低巰基化水平可能是導(dǎo)致一氧化氮活性減弱和低環(huán)鳥甘酸水平的原因。繼而表明，氧化應(yīng)激可能是農(nóng)吉利甲素導(dǎo)致肺動脈高壓的一個因素。

制備 ^[4]

一種野百合堿的提取、純化方法通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：

1）原材料的處理：取干燥的野百合粉碎，過20-60目篩；

2）酶解：稱取一定量的粗粉，加入料液比為1：2~5、70~90%的乙醇浸泡，并加入粗粉重量0.1%~0.3%的生物酶在pH值4~5，溫度為45~50℃的條件下浸泡酶解1~3h；

3）超聲提取：酶解結(jié)束，將步驟（2）中的酶解物進行超聲提取1~2h，過濾，收集濾液，濾渣重復(fù)提取1~2次；

4）有機溶劑萃取：收集提取液減壓濃縮至原體積的1/5~1/3，收集濃縮液，依次加入濃縮液體積1/3、1/4、1/6的氯仿攪拌，靜置分層，棄去上層，收集下層，合并萃取液；

5）高速逆流色譜儀純化：萃取液采用高速逆流色譜純化，根據(jù)圖譜收集目標成分，回收試劑，冷凍干燥即得野百合堿。

主要參考資料

[1] 農(nóng)吉利的研究進展

[2] 從野百合種子中提取野百合堿的研究

[3] 實用處方及非處方藥物大全

[4] CN201510270112.3一種野百合堿的提取、純化方法