14216-03-6 / 常春藤苷C的含量測定

背景及概述^[1][2]

常春藤苷C其葉提取物中的常春藤苷C具有優秀的祛痰，解痙等作用，在臨床上已經用于治療呼吸道疾病，其已成為人們重視的天然活性成分，具有很大的藥用價值和市場前景。

含量測定^[3]

1色譜條件

Agilent1200高效液相色譜儀;ThermoHypersilBDS C18色譜柱(250mm×4.6mm，5μm);流動相:乙腈-水(28∶72);流速:0.8mL·min^-1，柱溫:35℃，檢測波長:201nm。

2對照品溶液的制備

取常春藤皂苷C對照品適量，加50%乙醇水制成每1mL含0.1mg的溶液，作為對照品溶液。

3供試品溶液的制備

取適量朝鮮白頭翁藥材，粉碎，過3號篩，精密稱定，稱取1g于具塞錐形瓶中，向其加入50%乙醇水溶液50mL，稱定重量，加熱回流1h，放冷，再稱定重量，用50%乙醇水補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液5mL置25mL量瓶中，加50%乙醇水定容至刻度，即得供試品溶液。

4方法學考察

4.1空白對照試驗

取50%乙醇水作為空白對照溶液，按1項下色譜條件進行測定分析，結果顯示，空白對照溶液在與常春藤皂苷C對照品色譜峰保留時間處無色譜峰，表明溶劑對測定沒有干擾(見圖1、2)。

4.2線性關系考察

分別精密吸取對照品溶液2、4、8、12、16、20μL注入色譜儀，按1項下色譜條件進行測定，以常春藤皂苷C的含量(μg)和相應的峰面積進行線性回歸，計算得回歸方程Y=364.5341X-1.3262，r=0.9999，結果表明常春藤皂苷C在0.220～2.203μg線性關系良好。

4.3精密度試驗

精密吸取同一份供試品溶液(S4)，按1項下色譜條件連續進樣6次，記錄峰

面積。結果顯示，供試品色譜峰峰面積的ＲSD=0.48%，表明儀器的精密度良好。

4.4穩定性試驗

精密吸取3項下的供試品溶液(S4)，按1項下色譜條件分別于0、6、8、12、

18、24h進樣，記錄峰面積。結果顯示常春藤皂苷C色譜峰峰面積的ＲSD=0.11%，表明供試品溶液中常春藤皂苷C在24h內穩定性良好。

4.5重復性試驗

取3項下的供試品溶液(S4)6份，分別照1項下方法測定，記錄峰面積。結果顯示常春藤皂苷C峰面積的ＲSD=1.44%，表明此方法的重復性良好

4.6回收率試驗

分別精密稱取樣品(S4)1g，共6份，分別加入常春藤皂苷C對照品適量，按2項下方法制備，按1項下色譜條件進行測定，計算常春藤皂苷C的回收率。結果見表2。

4.7耐用性試驗

實驗中選取了不同廠家色譜柱(ThermoHypersilBDSC18、PhenomenexGeminiC18、VenusilXDP C18)及不同廠家和型號的高效液相色譜儀(Agilent1290、島津LC-20A、WatersE2695)測定各供試品，結果顯示不同廠家色譜柱和不同儀器均

能對樣品進行較好分離，適用性良好。

5樣品測定

分別取不同產地的18批朝鮮白頭翁藥材，按3項下的方法制備供試品溶液，照1項下色譜條件進樣，記錄色譜圖，計算含量，結果見表3、圖3。

由表3可以看出，18批朝鮮白頭翁中常春藤皂苷C含量測定結果為0.806%～4.317%，差異較大，其中，采集于延吉市依蘭鎮臺巖村的朝鮮白頭翁(S3)中常春藤皂苷C含量最高，為4.317%;而采集于通化縣東來鄉的樣品(S15)中常春藤皂苷C含量最低，僅為0.806%。

主要參考資料

[1][中國發明,中國發明授權]CN201310618958.2從常春藤葉中分離常春藤苷C及苷元的方法

[2][中國發明,中國發明授權]CN200710034341.0一種從常春藤中制備常春藤苷C的方法